熒光染料亮度怎么進(jìn)行比較?
熒光染料是細胞生物學(xué)等科學(xué)研究中不可或缺的重要工具，熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關(guān)重要的一個(gè)部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時(shí)候，我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度，那么一般熒光染料亮度怎么進(jìn)行比較?
熒光染料的亮度可以用來(lái)比較不同熒光染料的熒光標記效果，通過(guò)陰性細胞群與陽(yáng)性細胞群的熒光信號之間的關(guān)系來(lái)表示。但陰性細胞群的熒光信號受到信號強度、自發(fā)熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個(gè)因素相關(guān)。
熒光染料染色指數是陽(yáng)性細胞群的平均熒光強度與陰性細胞群的平均熒光強度之差與陰性細胞群熒光強度標準差之間比值的一半。熒光染料染色系數只和抗體克隆與質(zhì)量、熒光團純度與質(zhì)量、熒光修飾比、激光線(xiàn)及其功率、長(cháng)通和帶通濾光片、目的細胞等因素相關(guān)。
熒光染料的染色指數與熒光染料的亮度呈正相關(guān)，也就是熒光染料亮度越高，染色系數也就高。
DNA染料：
DAPI熒光染料，超純，AAT-17510
凋亡細胞核酸藍色染料，AAT-17548
圖1.用Cell Navigator?脂質(zhì)液滴熒光測定試劑盒(Cat#22735)和Nuclear Green?LCS1(Cat#17540)染色的油酸處理過(guò)的HeLa細胞的熒光圖像。
細胞增殖染料：
藍色活細胞熒光探針CytoTell Blue，AAT-22251
圖2.用CytoTell?Green和CFSE進(jìn)行的細胞增殖測定。在第0天，用CytoTell?Green或CFSE對Jurkat細胞(?2×106細胞/ mL)進(jìn)行染色。在指定的那天，以1：1的比例連續通過(guò)細胞。在通過(guò)當天，在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細胞儀測量熒光強度。連續幾代人以不同的顏色代表。
細胞活力檢測染料
鈣黃綠素熒光染料，超級純，AAT-22006
圖3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa細胞圖像。細胞核用Hoechst 33342(Blue，Cat#17535)染色。
熒光標記染料
iFluor 350琥珀酰SE，AAT-1020
圖4.將 HeLa細胞與(Tubulin +)或不與(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育，然后與iFluor?488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色，左)或AlexaFluor?488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色，右)。細胞核用Hoechst 33342(藍色)染色。
